期刊简介
本刊办刊宗旨为反映我院科研教学及临床方面的研究成果，实践经验及教训，提高科研教学，临床医疗水平，促进医学学术交流，同时为各教学医院及兄弟医疗单位提供发表科研成果的阵地。读者对象为医务工作者，医学院校师生。
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首页>神经药理学报杂志
- 杂志名称：神经药理学报杂志
- 主管单位：河北省教育厅
- 主办单位：河北北方学院 中国药理学会
- 国际刊号：2095-1396
- 国内刊号：13-1404/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), 知网收录(中)
大鼠海马神经元及星形胶质细胞的体外培养
张楠；熊文雯；邢媛；张炜
关键词：细胞培养, 海马, 神经元, 星形胶质细胞
摘要：目的:改进大鼠海马神经元、星形胶质细胞及两者混合状态的体外培养方法,获得高纯度的海马神经细胞.方法:选取孕期18～20 d的SD大鼠胎鼠作为原代海马细胞培养的材料来源.断头后于冰板上剥离双侧海马,去除表面血管及薄膜,利用眼科剪分离为小块.随后使用冷平衡盐溶液洗涤3次,将海马组织碎块移入酶消化液中.本方法选择Accutase和0.1％DNase作为酶消化液,37℃消化15 min,期间轻柔振动.使用冷平衡盐溶液洗涤3次,终止消化.0.1％DNase加入Neurobasal和B-27的混合液对消化后的海马组织碎块进行轻柔吹打,获得单细胞悬液.将悬液过200目筛,进行细胞计数.将过筛的单细胞悬液移入DMEM培养基(DMEM+10％胎牛血清)中,按照每平方厘米2.5×104的细胞密度进行接种.经PDL孵育的塑料片置于培养基底部.细胞于37℃、5％CO2培养箱内培养.4 h后,依据所需细胞种类的不同,更换相应培养基.海马神经细胞于培养后7～10 d可用于实验.结果:通过本方法可得到高纯度的大鼠海马神经细胞,且根据实验需求,通过更换培养基,可得到纯神经元、纯胶质细胞及两者混合的三种培养状态.培养的神经元及星形胶质细胞纯度均>98％.结论:该文在传统海马神经细胞体外培养方法基础上,进一步降低了实验操作难度,方法稳定有效.
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